细胞培养的方法

细胞培养的概述

细胞培养是指将组织或细胞从其体内环境中分离，放入一种含有必需营养成分、生长因子和温度、氧气、二氧化碳等等控制因素的培养基中，使其在体外繁殖、生长和分化的一系列实验技术。细胞培养在生物、医学等地方有广泛应用，如细胞学、病毒学、肿瘤学、生殖医学和药物研发等等。细胞培养有不同的方法和技术，本文将对常用的几种方法分别介绍。

原代细胞培养

原代细胞培养是指从组织或器官中分离新鲜的细胞，并进行培养，将其生长并繁殖。这种方法通常用于初步筛选和验证实验。原代细胞培养的操作相对简单，但细胞来源的量和质量有限。要注意的是，不同来源的细胞生长需要的条件、营养需求、形态特征等均有所不同。

细胞系保存技术

细胞系是指细胞在体外连续培养并传代下去，形成的一系列同一物种、具有相同遗传性质、形态和生理学特征的细胞群。细胞系保存技术是将细胞系冷冻在液氮中，以便长期保存和无菌传代。冻存细胞系减少了实验时对原始细胞的依赖，使细胞的来源更加稳定可靠。在进行细胞系保存前，必须对细胞系进行检测，以确认其无菌且遗传稳定性良好。

细胞贴壁培养技术

细胞贴壁培养技术是将生长良好的细胞从培养瓶中离心收集，去掉上清液中的细胞碎片和培养液，然后加入预热的培养基中振荡分散，细胞分散均匀后接种于培养瓶或培养皿中。在培养过程中，细胞会逐渐附着在培养瓶或培养皿的表面，形成一个单层细胞群，并形成一个细胞-培养基的稳定界面。细胞贴壁技术的使用广泛，适用于大多数细胞类型，但一些高特异性的细胞类型（如神经元）可能不易附着。

悬浮培养技术

悬浮培养技术是指将生长良好的细胞从培养瓶中离心收集，去掉上清液中的细胞碎片和培养液，然后分散到含有营养物质和生长因子的培养基中，培养在无规则搅拌的条件下。此技术适用于那些无法贴壁生长的细胞，如血细胞、肝细胞等。由于这种细胞是悬浮在培养基中，所以需要定期更换新的营养液来满足其生长需要，并防止细菌、真菌等微生物的污染。